/biology-notes

OtherNOASSERTION

高中生物实验知识点总结

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.

必修 1

实验 1：物质的检测

  • 还原糖
    • 斐林试剂
      • 甲 0.1g/mL NaOH 溶液，乙 0.05g/mL 的 CuSO4
      • 甲乙混匀，现配现用
    • 选材
      • 不能用西瓜（有色），不能用甘蔗（蔗糖不是还原糖）
  • 脂肪
    • 制作临时切片
      • 用刀片在花生子叶的横断面上切薄片，放在盛有清水的培养皿中，用毛笔蘸取放在载玻片**，在花生子叶薄片上滴 2-3 滴苏丹 III 染液，3min 后用吸水纸吸去染液，再滴加 1-2 滴 体积分数 50% 的 酒精溶液，再用吸水纸吸去酒精，滴一滴蒸馏水。
      • 先低倍再高倍
      • 结果：脂肪颗粒被染成橘黄色
  • 蛋白质
    • A 0.1g/mL NaOH， B 0.05 g/mL CuSO4
    • 与蛋白质反应成紫色

实验 2：胞质环流

  • 选材：黑藻（真核生物，被子植物）
    • 原因：叶片较薄，方便观察
    • 要事先放在光照，rt 下培养

实验 3：【重要】质壁分离

  • 选材：紫色洋葱鳞片叶外表皮
    • 因为有紫色的大液泡
    • 内表皮没有大液泡，是无色的
  • 实验原理：原生质层相当于一个半透膜
  • 从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸引流，重复几次
  • 用低倍显微镜观察（本实验是高中阶段唯一一个只用到低倍镜的实验！）
  • 再滴清水重复实验，来观察复原
  • 如果用硝酸钾等，则可以自动复原
  • 不能在蔗糖溶液里泡太久，否则有可能泡死
  • 发生质壁分离后，细胞壁和细胞膜（原生质层）分开，中间充满了外界溶液

实验 4：酶的专一性

  • 配置
    序号 项目 试管 1 试管 2
    1 注入可溶性淀粉溶液 2mL ---
    2 注入蔗糖溶液 --- 2mL
    3 注入新鲜的淀粉酶溶液 2mL 2mL
  • 检测
    • 检测的是有没有产生还原糖（葡萄糖），不能检测淀粉，因为只要有一点点剩余就是阳性

实验 5：影响酶活性的条件

  • 温度
    • 选材
      • 淀粉酶
      • 不用过氧化氢酶，因为过氧化氢分解本身就受温度影响
    • 先保温，后加酶（酶最好也要保温再加），排除加热过程温度不同的影响
  • pH
    • 同样的，先调 pH 再加酶

实验 6：探究酵母菌细胞呼吸的方式

  • 进入的空气必须先过氢氧化钠，排除空气中原有二氧化碳的影响
  • 检测酒精时，必须要将酵母菌的培养时间适当延长
    • 这是因为葡萄糖也能和重铬酸钾反应（醛基）

实验 7：绿叶中色素的提取和分离

  • 药品
    • 新鲜的绿叶
      • 剪掉主叶脉
    • 无水乙醇（提取液）
    • 层析液
    • 二氧化硅（有助于研磨充分）
    • 碳酸钙（防止绿叶中色素被破坏）
  • 滤纸条
    • 将滤纸条一端剪取两角
      • 这是为了使各位置上升速度均匀
  • 结果
    • 从色素带的宽度可推知色素含量的多少依次为:叶绿素a,叶绿素b,叶黄素,胡萝卜素。
    • 从色素带的位置可推知色素在层析液中的溶解度大小依次为:胡萝卜素,叶黄素,叶绿素a, 叶绿素b。

实验 8：观察洋葱根尖细胞有丝分裂

  • 解离
    • 时间 3-5 min
    • 质量分数为 15% 的盐酸（杀死细胞），质量分数为 95% 的酒精（使细胞分离开来）
    • 最好选择上午 10:00 - 下午 2:00 的细胞，因此时较多细胞处于分裂期
  • 漂洗
    • 时间 10min
    • 待根尖软化后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗
  • 染色
    • 醋酸洋红或者甲紫（碱性染料，但本身是酸性的）
    • 时间 3-5min
  • 制片
    • 用镊子取出根尖，放在载玻片上，加一滴清水，用镊子尖把根尖弄碎，盖上盖玻片，用拇指轻轻按压（目的都是使细胞分散开来，便于观察）
    • 注意分散和分离的区别！
  • 观察
    • 先在低倍镜下，寻找分生区细胞
      • 描述：细胞呈正方形，排列紧密
    • 再换用高倍镜，先找中期，再找其他各个时期的细胞
    • 调节放大倍数，要求视野中同时看到约 50 个细胞。

必修 2

实验 9：低温诱导植物细胞染色体数目的变化

  • 选材和准备
    • 把洋葱/蒜放在 4 度的冷藏室里放置一周
    • 取出后，再放到有清水的容器上方，让底部接触水面
    • 长出 1cm 长不定根时，扔进冰箱冷藏室处理 48h 到 72h，诱导加倍
  • 固定和制片
    • 用卡诺氏液进行固定
    • 剪取诱导加倍的根尖0.5-1cm，放在卡诺氏液中，固定细胞形态，用体积分数为 95% 的乙醇冲洗 2 次。
    • 后面和有丝实验一样

选择性必修 1

实验 10：探索植物生长调节剂的应用

浸泡法：把基部浸泡在配制好的溶液中，深约 3cm。处理 1d 沾蘸法：在高浓度中蘸 5s，深约 1.5cm

选择性必修 2

实验 11：培养液中酵母菌种群数量的变化

  1. 每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。

  2. 从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。

  3. 如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释 n 倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。

  4. 活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。

  5. 对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。计数时，如果使用 $16 \times 25$ 格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数；如果规格为 $25 \times 16$ 格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数**的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。

  6. 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。

选择性必修 3

实验 12：制作传统发酵食品

制作泡菜

  • 先装蔬菜到一半
  • 再放香辛料到 80%
  • 最后用盐水浸没

制作果酒果醋

  • 用体积分数为 70% 的乙醇消毒
  • 果酒：18-30度，10-12d；果醋：30-35度，7-8d
  • 果酒时，每隔 12h 左右要把瓶盖拧松一次
  • 果醋时，打开瓶盖，盖上纱布

实验 13：酵母菌的纯培养

  • 制备培养基
    • 去皮马铃薯
  • 灭菌
    • 将培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包牛皮纸，皮筋勒紧，高压蒸汽灭菌
  • 倒平板
    • 冷却到 50 度后，在酒精灯附近倒平板
      • 把瓶口迅速通过酒精灯火焰
      • 倒完后培养皿倒置
    • 接种
      • 将接种环放在火焰上灼烧到红
      • 在火焰旁冷却
      • 试管口过火焰
      • 在火焰附近蘸取一环菌液
      • 试管口再过火焰
      • 划线

实验 14：菊花的组织培养

  • 消毒
    • 将外植体用70%乙醇消毒 30s，用无菌水清洗 2-3 次，再用～5%次氯酸钠溶液处理 30min
  • 脱分化
  • 培养愈伤组织
    • 18-22 度
  • 再分化
  • 炼苗
    • 先打开封口膜，让试管苗在培养箱内部生长几天
    • 再将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩上
    • 长壮后，移栽入土

实验 15：DNA 的粗提取与鉴定

  • 离心洋葱研磨液，在上清液中加入 95%的乙醇 （用于使蛋白质溶解，DNA 析出），静置 2-3 min，用玻璃棒卷起丝状物
  • 取 2 支试管各加入 2mol/L NaCl 溶液 5 mL（原因：DNA 在这个浓度的氯化钠溶液中溶解度最高），其中一支再加入 DNA，再加入 4mL 的二苯胺试剂，沸水浴中加热 5min，有 DNA 的试管溶液变蓝。